分子杂交仪工作原理、分类以及注意事项

分子杂交仪（又名：分子杂交箱、分子杂交炉）广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用，而且在临床诊断上的应用也日趋增多。

分子杂交仪工作原理

分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。

核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是：互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链，即能够进行杂交。这种结合是特异的，即严格按照碱基互补的原则进行，它不仅能在DNA和DNA之间进行，也能在DNA和RNA之间进行。因此，当用一段已知基因的核酸序列作出探针，与变性后的单链基因组DNA接触时，如果两者的碱基完全配对，它们即互补地结合成双链，从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。由此可见，进行基因检测有两个必要条件，一是必需的特异的DNA探针;二是必需的基因组DNA。当两者都变性呈单链状态时，就能进行分子杂交。

分子杂交仪分类

根据实验的需求，可以将分子杂交仪分为5大类。

1、是用于大容量的分子杂交仪;

2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;

3、用于小容量的核酸杂交仪;

4、微孔板原位杂交仪;

5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;

6、Western杂交仪。

原位分子杂交，斑点分子杂交，所用的分子杂交箱是振荡式的摇床分子杂交箱;Southern、Northern、Western杂交，所用的杂交仪是旋子式杂交仪，仪器采用独特的滚动式反应架装置，配套特制密封杂交管在水平轴上旋转，使杂交管内壁上的杂交反应膜各处能均匀地杂交液反复地接触，充分反应。

功能能齐全的分子杂交仪仪器部件有：箱体、杂交瓶转架或离心管转架、杂交管、摇床、隔膜、电脑控制系统等部件组成。可用于Southern、Northern、Western等分子杂交，还可以用于原位杂交。不同型号的箱体容纳的管子数，微孔版数，载波片数和平板数也不同。分子杂交仪的结构和功能。

功能能齐全的分子杂交仪都有一下功能：微电脑智能控制，液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。具有存储记忆功能，可以直观显示系统的运行状况。温度控制采用数字PID技术，输出采用PWM方式，控温精度高，稳定性好，并设有超温保护装置，该仪器可以同时直观箱内控温温度，滚动式瓶架旋转速度，酶标板或试剂托盘的摆动速度。同时任意选择您所需要的控温温度，瓶架旋转速度，摇床摆动速度。

分子杂交仪注意事项

1．分子杂交仪需要安装在有良好接触的电源插座上。

2．恒温室处于高温状态装取杂交管时，注意不要烫伤！

3．杂交管在装入反应液前一定要清洗干净，装入反应液及反应膜后一定要拧紧瓶盖，以免漏夜。

4. 在进行同位素标记的杂交实验时，必须检查杂交管的密封情况，以免造成污染。一旦发生污染，请及时告知有关部门的使用人员和检修人员，尽可能的减少不必要的伤害。

由于分子杂交仪设计结构紧凑，密封性要求高，所以在仪器运行中出现故障需要检修时，应切断电源由专业技术人员进行。